期刊简介
本刊前身《生理科学》”于1981年创刊，1984年为国内统一刊物面向全国公开发行，1990年正式改名为“基础医学与临床”，为我国仅有的几份基础医学与临床医学相结合的综合性杂志之一，由北京生理科学会主办。刊物自2005年起改为月刊。每期设专题综述（约请有关专家撰写本专题的现状与最新进展，并紧密结合临床）或医学论坛、学术论文及短文、最新技术与方法等栏目。另新设栏目有：协和CPC、协和内科大查房、临床园地、医学教育、短篇综述、新闻点击、科普沙龙。现为北京市优秀期刊及中国自然科学核心期刊。
往期目录
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首页>基础医学与临床杂志
- 杂志名称：基础医学与临床杂志
- 主管单位：北京市科学技术协会
- 主办单位：北京生理科学会
- 国际刊号：82-358
- 国内刊号：1001-6325
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：北京市优秀期刊（91）期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
靶向TPX2基因shRNA慢病毒载体的构建及鉴定
常海平；宋淑芳；任杰
关键词：宫颈癌, TPX2-shRNA, 慢病毒
摘要：目的 构建靶向TPX2基因的RNA干扰慢病毒载体,获得稳定感染的人宫颈癌HeLa细胞株,为宫颈癌细胞TPX2基因的相关研究奠定基础.方法 以TPX2基因为靶点,设计并合成四组对应于目标shRNA的双链DNA发卡结构,分别与慢病毒载体Pglv2-U6-Puro连接经转化感受态细胞,阳性克隆经测序、病毒包装、滴度测定、感染细胞、嘌呤霉素筛选得到TPX2基因沉默稳转细胞株.实时荧光定量PCR和Western blot检测TPX2 mRNA和蛋白的沉默效果.流式细胞计量术检测其对细胞周期分布及凋亡的影响.结果 测序结果证实5种慢病毒载体均包装成功,采用0.4 μg/mL嘌呤霉素成功筛选出TPX2沉默细胞株.HeLa细胞感染4种载有TPX2-shRNA的重组慢病毒后,均发挥了沉默效应,尤以TPX2-shRNA-1沉默效果佳,TPX2 mRNA相对表达量为0.21±0.07,低于对照组的1.08±0.07(P＜0.01);TPX2蛋白质相对表达量为0.19±0.28,低于对照组的0.64±0.03(P＜0.01);G2及S期细胞高于对照组(P＜0.05);细胞凋亡率明显多于对照组(P＜0.05).结论 获得了一种有效TPX2基因的干扰序列,成功构建了TPX2shRNA慢病毒干扰载体,并筛选出TPX2基因沉默的HeLa细胞株,为进一步研究TPX2基因在宫颈癌中的作用奠定了基础.
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