期刊简介
本刊前身《生理科学》”于1981年创刊，1984年为国内统一刊物面向全国公开发行，1990年正式改名为“基础医学与临床”，为我国仅有的几份基础医学与临床医学相结合的综合性杂志之一，由北京生理科学会主办。刊物自2005年起改为月刊。每期设专题综述（约请有关专家撰写本专题的现状与最新进展，并紧密结合临床）或医学论坛、学术论文及短文、最新技术与方法等栏目。另新设栏目有：协和CPC、协和内科大查房、临床园地、医学教育、短篇综述、新闻点击、科普沙龙。现为北京市优秀期刊及中国自然科学核心期刊。
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首页>基础医学与临床杂志
- 杂志名称：基础医学与临床杂志
- 主管单位：北京市科学技术协会
- 主办单位：北京生理科学会
- 国际刊号：82-358
- 国内刊号：1001-6325
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：北京市优秀期刊（91）期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
人HIF-1α基因RNAi重组腺病毒的构建及对人肺腺癌SPCA-1细胞HIF-1α表达的影响
宋现让；魏玲；王兴武；宋宝；郑燕
关键词：肺癌, 乏氧诱导因子-1α, RNA干扰, 腺病毒, 基因治疗
摘要：目的 构建人HIF-1α基因RNAi重组腺病毒Ad.HIF-1α,并观察其对人肺腺癌细胞SPCA-1的影响.方法 采用酶切、连接、转化等方法,利用AdEasy系统构建插入HIF-1α RNAi片段的重组腺病毒Ad.HIF-1α.氯化铯梯度离心法纯化病毒.病毒功能滴度采用传导293细胞的方法,以2 MOI Ad.HIF1α传导SPCA-1细胞,48 h后应用流式细胞术检测绿色荧光蛋白(GFP)表达和HIF-1α蛋白表达.HIF-1α mRNA表达用荧光定量PCR检测.结果 酶切和卡那霉素抗性筛选证实,重组穿梭载体pAdTrack.HIF-1α和腺病毒质粒pAd.HIF-1α均构建正确.pAd.HIF-1α导入293细胞3 d,约15%的细胞表达GFP,终所获病毒滴度为5.0×1010TU/mL.Ad.HIF-1α转导SPCA-1细胞48 h,GFP表达率为92%;HIF-1α mRNA和蛋白表达分别下降89%和87%.结论 成功构建人HIF-1α基因RNAi腺病毒,为通过阻断HIF-1α基因治疗肺癌提供初步实验依据.
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